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IPS诱导内耳类器官培养指南 - 新葡萄8883官网AMG方法分享

发布时间:2025-08-01   信息来源:尊龙凯时官方编辑

新葡萄8883官网AMG提供了一款有效的hPSC诱导分化内耳类器官试剂盒(产品编码:abs90132-1kit),此试剂盒用于生成内耳类器官。以下是该试剂盒的详细组成及实验准备。

IPS诱导内耳类器官培养指南 - 新葡萄8883官网AMG方法分享

一、实验准备

1. 试剂盒产品组成

- 培养阶段:

  • EB诱导阶段:
    • IE01EB形成培养基:30mL,保存于-20℃,可存放12个月。
    • IE01-A补充剂A:40μL,保存于-20℃,可存放6个月。
  • EB分化阶段:
    • IE02基础培养基:120mL,保存于-20℃,可存放12个月。
    • IE02-B补充剂B:250μL,保存于-20℃,可存放6个月。
    • IE02-C补充剂C:70μL,保存于-20℃,可存放6个月。
    • IE02-D补充剂D:50μL,保存于-20℃,可存放6个月。
  • 耳泡形成阶段:
    • IE03基础培养基:250mL,保存于-20℃,可存放12个月。
    • IE03-E补充剂E:12mL,保存于-20℃,可存放6个月。
  • 内耳类器官成熟阶段:
    • IE04成熟培养基:200mL,保存于-20℃,可存放12个月。
    • 类器官成熟阶段Matrigel:500μL,保存于-20℃,可存放6个月。

2. 辅助试剂

以下为实验中所需辅助试剂:

  • PBS(货号:abs962):500mL,储存于2-8℃或室温,有效期12个月。
  • Advance人多能干细胞培养基(货号:abs9404):100mL,储存于-20℃,有效期2年。
  • 人多能干细胞消化液(货号:abs9409):100mL,储存于-20℃,有效期2年。

3. 实验耗材

所需耗材包括:

  • 标准透明6孔细胞培养板(货号:abs7033):1箱,室温,保质期3年。
  • 标准透明12孔细胞培养板(货号:abs7034):1箱,室温,保质期3年。
  • 标准透明24孔细胞培养板(货号:abs7035):1箱,室温,保质期3年。
  • 15mL离心管(货号:abs7119):1箱,室温,保质期3年。
  • 50mL离心管(货号:abs7121):1箱,室温,保质期3年。
  • 10mL一次性移液管(货号:abs7053):1箱,室温,保质期3年。
  • 200μL吸头(盒装,无菌无酶,货号:abs7075):1箱,室温,保质期3年。

二、诱导流程概述

本实验涉及如下主要步骤:

1. EB形成(2天)

首先在基质胶包被的六孔板中培养hPSC,随后进行消化和EB形成培养基的制备。最终将形成的细胞悬液接种于96孔板中,注意控制培养条件。

2. EB分化阶段(12天)

在此阶段,通过补充各种基质和添加剂,促进EB的分化和发育。培养条件需保持稳定,以确保培养效果。

3. 耳泡形成阶段(6天)

在EB诱导结束后,准备培养基并转移细胞以诱导耳泡的形成。整个过程要注意培养基的更换和温度条件。

4. 内耳类器官成熟阶段(42天)

该阶段为培养类器官,需更换成熟培养基,定期更换培养基以维持细胞的健康生长,最终观察成熟的内耳类器官。

三、内耳类器官鉴定

根据实验要求,鉴定内耳类器官的成熟状态及功能。为确保标准化操作,推荐使用新葡萄8883官网AMG的相关试剂盒,确保实验成功的实现。

总之,新葡萄8883官网AMG提供了完善的试剂和耗材,全方位支持内耳类器官的研究与应用,助力生物医药领域的创新发展。