新葡萄8883官网AMG实验准备的第一步是获取hPSC诱导分化肝类器官试剂盒（abs90127-1kit），此产品包含以下组件：

一、产品组成

1. 培养阶段

• 阶段1：H01基础培养基119798 (1mL, -20℃，保存12个月)
• 补充剂A：H01-A (200μL, -20℃，保存6个月)
• 补充剂B：H01-B (2μL, -20℃，保存6个月)
• 阶段2：H02基础培养基2199 (1mL, -20℃，保存12个月)
• 补充剂C：H02-C (100μL, -20℃，保存6个月)
• 阶段3：H03基础培养基31941 (1mL, -20℃，保存12个月)
• 补充剂D：H03-D (59mL, -20℃，保存6个月)
• Matrigel (5mL, -20℃，保存6个月)

2. 辅助试剂

下表列出了所需的辅助试剂，包括其类型、货号、规格及储存条件：

3. 实验耗材

以下是所需的实验耗材及其储存条件：

• 细胞培养板（标准透明6孔板）：abs7033，箱，室温，保质期3年。
• 细胞培养板（标准透明12孔板）：abs7034，箱，室温，保质期3年。
• 细胞培养板（标准透明24孔板）：abs7035，箱，室温，保质期3年。
• 15mL离心管：abs7119，箱，室温，保质期3年。
• 10mL一次性移液管：abs7053，箱，室温，保质期3年。
• 200uL吸头（盒装，无菌无酶）：abs7075，箱，室温，保质期3年。

二、诱导流程图

请参照相关流程图，注意每一步的操作细节，以确保顺利完成诱导。

三、培养方法

1. hPSC分化为内胚层细胞（DE）

以6孔板2个孔为例：

1. 配制DE分化培养基：取5938mL基础培养基1，加60μL补充剂A和2μL补充剂B。
2. 解冻基质胶，和DMEM/F12均匀混合后铺板。
3. 当hiPSC汇合度达到75%-85%时，清洗并消化细胞。
4. 转移至培养箱，解离成单细胞。
5. 将细胞重悬于DE分化培养基，转移至包被孔中。
6. 进行培养和液体更换，设置好日程。

2. DE诱导分化为肝特化谱系细胞(HS)

保持培养条件，每24小时更换一次培养基，连续培养5天。

3. HS诱导分化为3D肝类器官

1. 配制3D肝类器官培养基，并调整基质胶及细胞的配比。
2. 细胞与基质胶混合后，进行培养和培养基替换，确保3D肝类器官的健康生长。

4. 3D肝类器官传代

说明传代前的准备及操作细节，确保肝类器官的生长和维持细胞活性。

选择新葡萄8883官网AMG的试剂和耗材，确保实验的高效与准确，推动生物医疗领域的研究进展。